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      一級結構 ? 肽圖分析

      UPLC質量肽圖分析是蛋白質一級結構研究中極為重要的手段之一,不但可以比較重組與天然蛋白質結果之間的同一性,確認基因工程上游和下游處理過程中是否發生差錯、重組產物中是否存在后轉譯化學修飾及未預期氨基酸的變異等,而且不同批次產品的肽譜比較可驗證工藝過程的穩定性。因此,肽譜分析在生物醫藥產品質控中尤為重要。

      ·檢測依據

        - 中國藥典2020年版三部通則(3405)肽圖檢查法

        - 中國藥典2020年版四部通則(0431)質譜法

       

      ·原理

        - 由于不同蛋白質的氨基酸序列(一級結構)不同,經酶水解后產生不同的肽段,這些肽段在反相色譜柱中的保留不同,經梯度洗脫后依次被質譜檢出,從而得到具有特征的肽譜圖和肽段序列。

       

      ·檢測范圍

        - 蛋白質樣品,包括但不限于中間產物、原液、成品和穩定性樣品。

       

      ·主要設備

        - 高分辨質譜儀:XevoG2-XS QTof

        - 超高效液相色譜:Acquity UPLCⅠ-Class

      ·樣品要求

        - 總量:大于300μg

        - 狀態:無色澄清液體/白色固體

        - 純度:大于1mg/ml

       

      ·交付內容

        - 序列覆蓋率

        - N/C末端序列確證

        - 質量肽圖(UPLC-MS/MS)

        - 翻譯后修飾分析(氧化、脫酰胺、N/O糖基化等)

        - 二硫鍵定位

        - 質譜法全序列

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