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      活性檢測 ? 報告基因法

       

      ·檢測依據

        - 中國藥典2020年版四部(3523)干擾素生物學活性測定法第二法報告基因法

        - Bright-Glo™ Luciferase  Assay System說明書

       

      ·原理                                                                                                  

        - 報告基因檢測通過構建相應的靶細胞(同時表達對應受體和信號通路的入核原件),使用該細胞株與對應抗體類藥物作用,從而激活報告基因的表達。通過檢測熒光素的表達量來反應細胞的激活程度,從而確定藥物的體外活性。例如使用過表達胰高血糖素樣肽-1受體(GLP-1R)的穩轉細胞株,在該細胞中,GLP-1類似物對GLP-1R的激活觸發cAMP的產生,cAMP則激活熒光素酶基因的表達,熒光素酶的活性通過生物發光進行定量,從而來確定GLP-1類似物的細胞活性。                                                                                                                         

       

      ·檢測范圍

        - 抗體類藥物、GLP-1類似物,包括但不限于中間產物、原液、成品和穩定性樣品。

       

      ·主要設備

        - Multidrop Combi                                                                           

        - 酶標儀

       

      ·樣品要求

        - 總量:大于1 mg

        - 狀態:無色澄清液體/固體

        - 純度:大于50μg/ml

       

      ·交付內容

        - 體外活性檢測方法開發、驗證和檢測報告等

       

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