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      工藝相關雜質 ? HCD殘留檢測

       

      ·檢測依據

        - 中國藥典2020年版四部通則(3407)外源性DNA殘留量測定法

       

      ·原理

        - 熒光染色法:應用雙鏈DNA熒光染料與雙鏈DNA特異結合形成復合物,在波長480nm激發下產生超強熒光信號,可用熒光酶標儀在波長520nm處進行檢測,在一定的DNA濃度范圍內以及在該熒光染料過量的情況下,熒光強度與DNA濃度成正比,根據供試品的熒光強度,計算供試品中的DNA殘留量。

        - 定量PCR法:通過熒光標記的特異性探針或熒光染料摻入而檢測PCR 產物量,通過連續監測反應體系中熒光數值的變化,可即時反映特異性擴增產物量的變化。在反應過程中所釋放的熒光強度達到預設的閾值時,體系的PCR循環數(Ct值)與該體系所含的起始DNA模板量的對數值呈線性關系。采用已知濃度的DNA標準品,依據以上關系,構建標準曲線,對特定模板進行定量分析,測定供試品中的外源DNA殘留量                                                   

       

      ·檢測范圍

        - 化藥或蛋白質樣品,包括但不限于中間產物、原液、成品和穩定性樣品。

       

      ·主要設備

        - 全自動核酸提取純化儀:P961001                                                                                  

        - 熒光定量PCR儀:CFX96TM Real-Time System                                                 

        - 酶標儀:Spectra Max M4                                                                                                   

      ·交付內容

        - HCD含量檢測結果

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